DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE LA HORMONA GONOGOTROPINA CORIONICA HUMANA (hCG)
PRINCIPIO DEL MÉTODO
La prueba de hCG-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección directa cualitativa de la hCG en orina y suero humanos. Las partículas de látex recubiertas con anticuerpo monoclonal anti-hCG (Nota 1) son aglutinadas por moléculas de hCG presentes en la muestra del paciente.
SIGNIFICADO CLÍNICO
La hCG es una hormona secretada por la placenta de la mujer embarazada que aparece relativamente pronto en sangre y orina después de la implantación del embrión fecundado. Puede ser detectada en orina a partir del tercer día de la perdida del periodo menstrual y su concentración sigue aumentando hasta
CALIBRACION
La sensibilidad del reactivo de látex está estandarizada frente al 3º Patrón Internacional de hCG 75/537 de NIBS (UK).
CONSERVACION Y ESTABILIDAD Todos los componentes del kit están listos para su uso, y son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, y se evita la contaminación durante su uso. No congelar: la congelación de los reactivos altera irreversiblemente la funcionalidad de éstos. Indicadores de deterioro de los reactivos: Presencia de partículas y turbidez.
MATERIAL ADICIONAL
- Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 80-100 r.p.m.
-Agitador vortex
-Pipetas de 50 ml
MUESTRAS
-Orina o suero fresco (Nota 2). Se recomienda utilizar la orina de la primera hora de la mañana, ya que generalmente contiene mayor concentración de hormona.
- Muestras de orina: estable 48 horas a 2-8ºC o 3 meses a –20ºC.
-Muestras de suero: estables 7 días a 2-8ºC o 3 meses a –20ºC.
Las muestras de suero u orina que presentan turbidez deben centrifugarse antes de la prueba.
No utilizar muestras de suero altamente hemolizadas o lipémicas.
PROCEDIMIENTO
1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas.
2. Depositar 100 µL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles Positivo y Negativo, sobre círculos distintos de un porta.
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de hCG- látex antes de usar. Depositar una gota (50 µL) junto a cada una de las gotas anteriores.
4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.
5. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80–100 r.p.m. durante 2 minutos
LECTURA E INTERPRETACION
Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación
inmediatamente después de retirar el porta del agitador. La presencia
de aglutinación indica una concentración de hCG igual o superior a
200 UI/L.(Nota 3).
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la
funcionalidad del reactivo de látex, así como modelo de comparación
para la interpretación de los resultados.
VALORES DE REFERENCIA
Suero: 5 – 50 UI/L entre 0,2 – 1 semana de gestación.
Orina: 50 – 5000 UI/L entre 1 – 2,5 semanas de gestación.
Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores
de referencia.
RESULTADO ORINA: NEGATIVO.
