TP Y TPT

TP Y TPT

DETERMINACION DE TP & TPT 

INTRODUCCIÓN: 

Los factores intrínsecos de la coagulación se activan en presencia de tromboplastina cálcica en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro calcio (CaCl₂) hasta la formación de coagulo de fibrina.

El tiempo de protombina (TP) o Tiempo de quick ha servido para determinar trastornos de coagulación, TP es la determinación más frecuente junto con la APTT.

MATERIAL:

• Baño maria
• Tubos de ensaye
• Centrifuga
• Pipeta de 200 microlitros
• Plasma

PROCEDIMIENTO:

1.  Introducir la muestra en la centrifuga a 3500  R.P.M.  durante 5 min. para obtener el plasma sanguíneo.
2. Separar 100 microlitros de plasma con ayuda de la pipeta  y depositar  en un tubo de ensaye. 
3. Seguidamente agregar 200 ML de reactivo de TP y tomar el tiempo con un valor de referencia de 13 segundos.
4. Separar 100 microlitros de plasma con ayuda de la pipeta  y depositar  en un tubo de ensaye.
5. Colocar 100 microlitros de reactivo de TPT en el mismo tubo.
6. Meter el tubo de ensaye a incubar en el baño maría durante 3 minutos
7. Al sacarlo inmediatamente agregar 100 microlitros de cloruro de calcio y medir el tiempo en que se forma el coagulo de fibrina con un valor de referencia de 37 segundos.

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• RESULTADOS
• Leslie: minuto con cinco.
• Yameli: minuto con diez. 
• Javier : veintinueve segundos.

Siento que esta practica la debemos de volver ah hacer, ya que algunos tiempos salieron muy tardados. y creemos que es por que las meidas esubieron mal 

FORMA INVERSA Y DIRECTA

FORMA INVERSA Y DIRECTA

PRUEBA DE LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO DE LA FORMA INVERSA

Introducción: 

El suero del paciente que contiene anticuerpos se pone en contacto con los eritrocitos que contienen antígenos formando un complejo Ag-Ac que se manifiesta microscópicamente mediante una aglutinación.

Material:

• 2 pipetas Pasteur
• 4 tubos de ensaye
• Gradilla 
• Centrifuga 
• Eritrocitos lavados A y B 
• Suero del paciente

Procedimiento:

1. Se preparan suspensiones de glóbulos rojos al 25 de la siguiente forma, en un tubo de ensaye marcado con la letra A se pone una gota de sangre A y en otro marcado con la letra B se pone una gota de sangre B, se llenan los tubos con solución salina se centrifuga a 3000 r.p.m. durante 3 min. y se decanta el liquido sobrenadante invirtiendo los tubos.
2. A cada uno de los tubos se añade 1 cm de solución salina.
3. Se marcan dos tubos de ensaye con la letra A y otro con la B, añadiendo dos gotas de suero.
4. Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 2 % al tubo A suspensión "A" y al tubo B suspensión "B".
5. Centrifugar a 1000 r.p.m. durante 2 min.
6. Sacar los tubos mezclando suavemente e interpretar el resultado.
   
   
   
   

   

   
   

   
   

   
   

   
   

   
   

   
   

   
   

   

   
   

   
   

   Interpretación de resultados:

• Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos A significa que tiene Ac B, el suero que tiene Ag A corresponde a la sangre B, el suero problema corresponde a un tipo de sangre del grupo B.
•  Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos B significa que tiene Ac B, el suero que tenga Ag B corresponde a la sangre A, el suero problema corresponde a un tipo de sangre del grupo A.
• Si el suero problema aglutina a  los glóbulos rojos A y B significa que tiene Ac A y B y este corresponde a la sangre O.
• Si el suero problema no aglutina en los globulos rojos A y B, significa que no tiene Ac A ni B, por lo tanto pertnece al grupo AB.

Detección de Antigeno de Superficie Hepatitis B en Suero Humano

Detección de Antigeno de Superficie Hepatitis B en Suero Humano

BIO HBsAG

Introducción:

La hepatitis B es una de las mayores causas de hepatitis en la población mundial. Los portadores de la enfermedad pueden no tener el síndrome pero son fuentes de infección.

En la prueba de tira existen dos regiones a lo largo de la membrana, la zona en donde se obtiene el resultado, denominada región test T y la región de control C, donde se verifica que el desarrollo de la prueba haya sido satisfactorio.

Material y reactivos:

• Tira de Bio-HBsAg
• Suero

Procedimiento:

1. Se saca la tira del sobre.
2. Se introduce el extremo de la tira que tendrá contacto con el suero, teniendo precaución que no se sumerja mas allá de la linea delimitada por las flechas.
3. Resultados altamente positivos aparecerán a partir del segundo o tercer minuto. Muestras positivas con una menor concentración podrán tardar hasta 15 min. No interpretarse resultados transcurridos 30 min.

Interpretación de resultados:

Positivo: Aparecerán dos lineas rojizas (una en la zona de test T y otra en la zona de Control C)

Negativo: La presencia de una linea rojiza en la zona de control C.

Resultados de la prueba:

Negativo.

VIH

VIH

Introducción: 
El realizar una prueba inmunocromatográfica de detección rápida de 
anticuerpos anti Virus de la Inmunodeficiencia Humana en el ámbito extra sanitario a 
escala mundial ha generado un cambio en la forma de hacer detección. En México esta 
actividad se ha dirigido a poblaciones clave, lo cual permite que los usuarios conozcan 
su estado serológico de manera rápida; en el estado de Morelos se conoce a las 
poblaciones clave y se cuenta con material y equipo para realizar un diagnóstico con 
base en estos reactivos, conocidos comúnmente como “pruebas rápidas”; sin embargo, 
las estrategias implantadas en el programa estatal de VIH/Sida para que las poblaciones 
clave accedan a estas pruebas no han sido documentadas y no se conoce qué grupos 
específicos, dentro de estas poblaciones, están utilizando las pruebas y por lo tanto si se 
cubren o no sus necesidades de diagnóstico oportuno. Objetivo. Documentar y analizar 
los procesos y estrategias que los servicios de salud del estado de Morelos (SSM) 
llevaron a cabo para diagnosticar los casos de VIH a partir de la aplicación de las 
“pruebas rápidas” en las poblaciones clave morelenses. Objetivos específicos: 1) Se 
detectaron las fuentes de información que permitieron documentar el caso en los SSM; 
2) se describieron los procesos administrativos internos y hacia el público para el acceso 
y utilización de las “pruebas rápidas” en los SSM; 3) se reconstruyó la ruta que, en la 
búsqueda del diagnóstico, llevaron a cabo las personas que sospecharon de su infección, 
para con ello conocer las barreras de acceso que enfrentaron durante su proceso de 
diagnóstico; 4) se compararon las cifras de utilización de las pruebas con la prevalencia 
de los casos positivos encontrados en los SSM durante el periodo seleccionado y se 
relacionaron con las estrategias diseñadas; 5) proponer acciones para extender la 
cobertura a las poblaciones clave de Morelos. Metodología. Estudio retrospectivo y 
longitudinal.

La prueba para VIH Uni-Gold™ es un ensayo que emplea un sólo reactivo para detectar 
anticuerpos contra los tipos 1 y 2 del VIH en suero, plasma o sangre. 
Esta prueba es un inmunoensayo rápido, en el cual se inmovilizan las proteínas 
recombinantes que representan las regiones inmuno dominantes de las proteínas de la 
envoltura de VIH-1 y VIH-2, las glicoproteínas gp41, gp120 (VIH-1) y la glicoproteína 
gp36 (VIH-2), en la región de ensayo de la tira de nitrocelulosa respectivamente. Estas 
proteínas también están ligadas a oro coloidal y quedan impregnadas debajo de la región 
de ensayo del dispositivo. También se sensibiliza una banda estrecha de la membrana de 
nitrocelulosa como región de control. Durante el ensayo, se aplican dos gotas de suero, 
plasma o sangre en el receptáculo para muestras, seguido de dos gotas de tampón de 
lavado y se deja que avance la reacción. Los anticuerpos de cualquier clase de 
inmunoglobulinas, específicos para las proteínas recombinantes VIH-1 o VIH-2, 
reaccionarán con los antígenos ligados al oro coloidal. El complejo de proteína del 
anticuerpo/oro coloidal se mueve cromatográficamente a lo largo de la membrana hasta 
las regiones de ensayo y control del dispositivo de ensayo. Una banda de color rosa/roja 
en la región de ensayo del dispositivo es indicativa de una reacción positiva. Se produce 
una reacción negativa en ausencia de los anticuerpos de inmunoglobulina humanos 
contra VIH en la muestra analizada. En consecuencia, no se desarrolla ninguna banda 

detectable visualmente en la región de ensayo del dispositivo. El exceso de conjugado forma una segunda banda de color rosa/roja en la región de control del dispositivo.


Material
-Pipeta
- Prueba rapida  VIH 1/2 

Sustancia
-Sangre- Suero 

Procediemiento 
Para la realización de la prueba rápida, se deben seguir los siguientes pasos. 

1. Retirar la prueba rápida del paquete y rotularla con el número de identificación del 
usuario. 
2. Colectar el espécimen utilizando la pipeta. 
3. Agregar 2 gotas (60µl) de espécimen en el pozo colector del dispositivo. 
4. Agregar 2 gotas (60µl) de solución absorbente en el pozo colector del dispositivo y 
espere 10 minutos para leer los resultados. 
5. Interpretar los resultados. 
Un resultado reactivo se interpreta con dos líneas de cualquier tonalidad de rojo en la 
tira; un resultado no reactivo es aquel con una línea en el área de control y en un 
resultado inválido no aparecen líneas, esto a causa de una mala técnica de 
procesamiento o porque la prueba esta caducada o defectuosa, en este caso no se 
reportan los resultados inválidos, se repite el paso 1 con una prueba nueva.

RESULTADO 

+

CONCLUSIONES

Esta prueba es muy sencilla de realizar, pero ah la misma ves complicada, ya que estamos trabajando con material que podría estar contaminado de una enfermedad grave y el alto riesgo de del poder contaminarlo.

Retracción del coagulo

Retracción del coagulo

OBJETIVO

Al término de la práctica el alumno será capaz de realizar e interpretar la prueba de R.C

INTRODUCCIÓN

 Puesto que el coágulo de fribrina encierra los elementos organizados (celulares) de la sangre (in vitro e in vivo) el volumen de los glóbulos rojos establece el límite inferior de la retracción de la fibrina. Por lo tanto, siendo normales los demás factores, el coágulo se retrae tanto más cuanto menor es el hematocrito. La retracción es directamente proporcional al número de plaquetas, e inversamente al hematocrito. Cuando las fibrinolinas son muy activas la fibrina puede disolverse casi tan rápidamente como se forma, y la retracción del coágulo se modifica en los transtornos de este tipo: choque, quemaduras etc.

Mide la cantidad de fibrina formada y su retracción; así como al número de función de las plaquetas, pues poseen una proteína similar a la actomiosina, que produce la retracción del coágulo.

MATERIAL

·         Tubos de ensaye para centrifugar

·         Alambre de 1 mm. De grosor

·         Baño maría de 37°c

·         Equipo de venopunción

TECNICA

1.       Se pone en un tubo de centrifuga graduado de 5 ml de sangre venosa recién obtenida. Se lleva el alambre al fondo del tubo.

2.       Se pone el tubo en el alambre, de un baño de agua a 37°c en donde se deja 1 hr. Después de la formación del coágulo sin tocarlo.

3.       Se saca el alambre cuidadosamente y se deja escurir dentro del tubo el coágulo unido al alambre durante 1 a 2 min.

4.       Se lee el volumen del líquido que quedo en el tubo. El resultado es expresar como un porcentaje del volumen inicial de 5 ml.

VALORES NORMALES:

Entre 48 y 64 por ciento.

RESULTADO:

Muestra 1: 50% y muestra 2: 46%

CONCLUSION

Esta practica, a diferencia de otras lleva un largo tiempo de procedimiento, por lo cual se debe de hacer con posicione y sin errores, asi como para tener un resultado confiable. 

Prueba de lazo o torniquete

Prueba de lazo o torniquete

Introducción:

Consiste en someter el antebrazo del paciente a una presión intermedia entre la sistólica y la diastólica durante 5 minutos. Tras la retirada del manguito inflable del tensiómetro, como para medir la T.A.  y esperar a que la piel recupere su estado relajado se observa la zona presionada. El conteo de petequias producidas por la rotura capilar en un área de unos 10 cm² superior a 30 da positivo en el signo de Rumpel-Leede.

Normalmente no debe de producirse mas de 5 petequias por debajo de la comprensión, más de 10 petequias y sobre todo extendidas mas alla del cuarto superior del antebrazo es patológico.   

Tiene como finalidad determinar la fragilidad de las paredes capilares, estimar la tendencia a la hemorragia y ayuda a reconocer la trombocitopenia.

Valores Normales:

0-10 = 1+

10-20 = 2+

20-50 = 3+

50 o más petequias = 4+

Los valores aumentados pueden indicar coagulación intravascular difusa. disminución del fibrinogeno, disminución de la protombina, deficiencia del factor VII, trombocitopenia, tromboastenia, deficiencia de vitamina K. Y puede estar asociado a afecciones no relacionados con trastornos de coagulación como: escarlatina, hipertensión, diabetes, gripe, sarampión, escorbuto.

Conclusiones

Esta practica es muy fácil de realizar, solo debemos de tener presente que las únicas petequias que se cuentan son las que estén dentro de la zona determinada. 

TIEMPO DE SANGRADO

TIEMPO DE SANGRADO 

Introducción 

El tiempo de sangrado mide la fase primaria de la hemostasia: la interacción de

las plaquetas con la pared del vaso sanguíneo y la formación del tapón

hemostático. El tiempo de  sangrado constituye

la mejor prueba para detectar alteraciones de la función plaquetaria y es uno

de los principales estudios en los trastornos de la coagulación. Se hace una

pequeña herida en el lóbulo auricular o en 

el antebrazo y se anota el tiempo de sangrado y la velocidad con al que

se forma el coágulo plaquetario. La duración del sangrado de un capilar depende

de la calidad y cantidad de plaquetas y de la vasoconstricción.

El tiempo de sangrado es una prueba muy útil

para detectar anormalidades vasculares y más o menos útiles para detectar

anormalidades plaquetarias. Se utiliza principalmente para el diagnostico de la

enfermedad de von Willebrand, defecto hereditario de la molécula del factor

VIII y un tipo de seudohemofilia. Se sabe que la aspirina causa hemorragia

anormal en algunas personas sanas, pero no 

se ha comprobado que el tiempo de sangrado sea útil siempre para

identificar a estas personas. A pesar de que se ha visto que en la

trombocitopenia el tiempo de sangrado suele ser prolongado, esta prueba

constituye un método indirecto para identificar esta enfermedad.

MÉTODO DE IVY

Principio

Mediante esta

prueba se estudia la adhesión de las plaquetas al endotelio vascular y su capacidad

para formar el trombo plaquetario que detiene la hemorragia a nivel de un vaso

de pequeño calibre. Consiste, por tanto, en realizar una pequeña herida y medir

el tiempo que tarde en dejar de sangrar.

Materiales

     1.- Esfingomanómetro

o tensiómetro de mercurio.

     

2.- Lanceta

(dispositivo descartable estandarizado para tiempo de sangría).

     

3.- Cronómetro.

     

4.- Papel

Wathman Nº 1, cortado en círculos.

     

5.- Vendita

compresiva.

     

6.- Algodón y

alcohol.

Técnica

1.   Exponer el

antebrazo del paciente y escoger una zona libre de vénulas, hematomas, heridas

y otros. Si el paciente tiene marcada cantidad de vellos, afeite la zona.

2.     Limpie con

alcohol la zona escogida.

3.     Coloque el

tensiómetro en el brazo del paciente y regúlelo a 40 mm Hg.

4.     Se extrae

la lanceta de su reservorio estéril y se quita el seguro. No deben pasar más de

30 a 60

segundos entre la inflada del tensiómetro y la producción de la incisión.

5.     Se

presiona el disparador al mismo tiempo que el cronómetro y un segundo después

retire el dispositivo.

6.     Cada 30

segundos secar con el papel de filtro, no tocar los bordes de la incisión para

no interferir con el tapón plaquetario. Se anota el tiempo que tarda en cesar

la hemorragia, lo que corresponde al tiempo de sangría.

 Interpretación del resultado

     

El valor normal del tiempo de sangría según esta metodología es de 2 a 8 minutos, por lo que los

valores superiores a 10 minutos puede ser ya considerado patológico. Cuando el

tiempo se alarga más de 20 minutos, puede detenerse la hemorragia aplicando

sobre la herida una compresa de algodón y gasa estéril si es muy profunda.

MÉTODO DE DUKE

Con una lanceta se hace una pequeña incisión en

el lóbulo de la oreja. La sangre fluye por esta incisión y se mide el tiempo

que transcurre hasta que se detiene el sangrado.

Este

ensayo se lleva a cabo:

     Para

diagnosticar ciertos padecimientos hemorrágicos.

     

Antes de

realizar operaciones quirúrgicas.

     

Antes de

efectuar una punción en el hígado o el bazo.

Materiales

Una lanceta estéril.

Éter.

Filtro de papel (o

papel secante).

Si es posible, un

cronómetro o, en su lugar, un reloj con segundero.

Técnica

1.-Con una lanceta estéril, se practica en el borde inferior del lobulo de la oreja una punción de 3mm de profundidad. Se pone en marcha el cronometro. 

2.- A intervalos de medio minuto, se aplica cuidadosamente sobre la gota de sangre el borde de un pequeño disco de papel filtro, cuidando de no tocar la piel,. Esta maniobra por objeto es impedir que se forme un coagulo en la gota de sangre sobre la herida, pues los tiempos de sangrado resultaran a normalmente bajos. 

3.- Utilizando una nueva zona de papel filtro para cada secado de medio minuto, puede tenerse un registro conveniente del tiempo total ( Tiempo en minutos =numero de gotas divididas entre dos) Se toma como punto final al momento en el cual el papel filtro ya no absorbe sangre. 

Resultados

     

Comunique

el tiempo de sangrado redondeándolo al medio minuto más cercano.

Observaciones

     

Si el

tiempo de sangrado se prolonga examine una extensión de sangre teñida según el

método de Romanowski para observar si las plaquetas son escasas.

Interpretación

del resultado

     

El valor

de referencia del tiempo de sangría según este método es de 1 a 4 segundos.

RESULTADOS:

• *Método de DUKE: 1:33 minutos.
• *Método de IVY:   3:48minutos.

CONCLUSIONEs

Esta practica es sencilla de realizar, pero necesitamos practicarla de nuevo,