sábado, 25 de octubre de 2014

VIH

VIH

Introducción: 
El realizar una prueba inmunocromatográfica de detección rápida de 
anticuerpos anti Virus de la Inmunodeficiencia Humana en el ámbito extra sanitario a 
escala mundial ha generado un cambio en la forma de hacer detección. En México esta 
actividad se ha dirigido a poblaciones clave, lo cual permite que los usuarios conozcan 
su estado serológico de manera rápida; en el estado de Morelos se conoce a las 
poblaciones clave y se cuenta con material y equipo para realizar un diagnóstico con 
base en estos reactivos, conocidos comúnmente como “pruebas rápidas”; sin embargo, 
las estrategias implantadas en el programa estatal de VIH/Sida para que las poblaciones 
clave accedan a estas pruebas no han sido documentadas y no se conoce qué grupos 
específicos, dentro de estas poblaciones, están utilizando las pruebas y por lo tanto si se 
cubren o no sus necesidades de diagnóstico oportuno. Objetivo. Documentar y analizar 
los procesos y estrategias que los servicios de salud del estado de Morelos (SSM) 
llevaron a cabo para diagnosticar los casos de VIH a partir de la aplicación de las 
“pruebas rápidas” en las poblaciones clave morelenses. Objetivos específicos: 1) Se 
detectaron las fuentes de información que permitieron documentar el caso en los SSM; 
2) se describieron los procesos administrativos internos y hacia el público para el acceso 
y utilización de las “pruebas rápidas” en los SSM; 3) se reconstruyó la ruta que, en la 
búsqueda del diagnóstico, llevaron a cabo las personas que sospecharon de su infección, 
para con ello conocer las barreras de acceso que enfrentaron durante su proceso de 
diagnóstico; 4) se compararon las cifras de utilización de las pruebas con la prevalencia 
de los casos positivos encontrados en los SSM durante el periodo seleccionado y se 
relacionaron con las estrategias diseñadas; 5) proponer acciones para extender la 
cobertura a las poblaciones clave de Morelos. Metodología. Estudio retrospectivo y 
longitudinal.

La prueba para VIH Uni-Gold™ es un ensayo que emplea un sólo reactivo para detectar 
anticuerpos contra los tipos 1 y 2 del VIH en suero, plasma o sangre. 
Esta prueba es un inmunoensayo rápido, en el cual se inmovilizan las proteínas 
recombinantes que representan las regiones inmuno dominantes de las proteínas de la 
envoltura de VIH-1 y VIH-2, las glicoproteínas gp41, gp120 (VIH-1) y la glicoproteína 
gp36 (VIH-2), en la región de ensayo de la tira de nitrocelulosa respectivamente. Estas 
proteínas también están ligadas a oro coloidal y quedan impregnadas debajo de la región 
de ensayo del dispositivo. También se sensibiliza una banda estrecha de la membrana de 
nitrocelulosa como región de control. Durante el ensayo, se aplican dos gotas de suero, 
plasma o sangre en el receptáculo para muestras, seguido de dos gotas de tampón de 
lavado y se deja que avance la reacción. Los anticuerpos de cualquier clase de 
inmunoglobulinas, específicos para las proteínas recombinantes VIH-1 o VIH-2, 
reaccionarán con los antígenos ligados al oro coloidal. El complejo de proteína del 
anticuerpo/oro coloidal se mueve cromatográficamente a lo largo de la membrana hasta 
las regiones de ensayo y control del dispositivo de ensayo. Una banda de color rosa/roja 
en la región de ensayo del dispositivo es indicativa de una reacción positiva. Se produce 
una reacción negativa en ausencia de los anticuerpos de inmunoglobulina humanos 
contra VIH en la muestra analizada. En consecuencia, no se desarrolla ninguna banda 

detectable visualmente en la región de ensayo del dispositivo. El exceso de conjugado forma una segunda banda de color rosa/roja en la región de control del dispositivo.


Material
-Pipeta
- Prueba rapida  VIH 1/2 

Sustancia
-Sangre- Suero 

Procediemiento 
Para la realización de la prueba rápida, se deben seguir los siguientes pasos. 

1. Retirar la prueba rápida del paquete y rotularla con el número de identificación del 
usuario. 
2. Colectar el espécimen utilizando la pipeta. 
3. Agregar 2 gotas (60µl) de espécimen en el pozo colector del dispositivo. 
4. Agregar 2 gotas (60µl) de solución absorbente en el pozo colector del dispositivo y 
espere 10 minutos para leer los resultados. 
5. Interpretar los resultados. 
Un resultado reactivo se interpreta con dos líneas de cualquier tonalidad de rojo en la 
tira; un resultado no reactivo es aquel con una línea en el área de control y en un 
resultado inválido no aparecen líneas, esto a causa de una mala técnica de 
procesamiento o porque la prueba esta caducada o defectuosa, en este caso no se 
reportan los resultados inválidos, se repite el paso 1 con una prueba nueva.










RESULTADO 
+


CONCLUSIONES
Esta prueba es muy sencilla de realizar, pero ah la misma ves complicada, ya que estamos trabajando con material que podría estar contaminado de una enfermedad grave y el alto riesgo de del poder contaminarlo.


sábado, 18 de octubre de 2014

Retracción del coagulo

Retracción del coagulo

OBJETIVO
Al término de la práctica el alumno será capaz de realizar e interpretar la prueba de R.C

INTRODUCCIÓN
 Puesto que el coágulo de fribrina encierra los elementos organizados (celulares) de la sangre (in vitro e in vivo) el volumen de los glóbulos rojos establece el límite inferior de la retracción de la fibrina. Por lo tanto, siendo normales los demás factores, el coágulo se retrae tanto más cuanto menor es el hematocrito. La retracción es directamente proporcional al número de plaquetas, e inversamente al hematocrito. Cuando las fibrinolinas son muy activas la fibrina puede disolverse casi tan rápidamente como se forma, y la retracción del coágulo se modifica en los transtornos de este tipo: choque, quemaduras etc.
Mide la cantidad de fibrina formada y su retracción; así como al número de función de las plaquetas, pues poseen una proteína similar a la actomiosina, que produce la retracción del coágulo.

MATERIAL
·         Tubos de ensaye para centrifugar
·         Alambre de 1 mm. De grosor
·         Baño maría de 37°c
·         Equipo de venopunción

TECNICA
1.       Se pone en un tubo de centrifuga graduado de 5 ml de sangre venosa recién obtenida. Se lleva el alambre al fondo del tubo.
2.       Se pone el tubo en el alambre, de un baño de agua a 37°c en donde se deja 1 hr. Después de la formación del coágulo sin tocarlo.
3.       Se saca el alambre cuidadosamente y se deja escurir dentro del tubo el coágulo unido al alambre durante 1 a 2 min.
4.       Se lee el volumen del líquido que quedo en el tubo. El resultado es expresar como un porcentaje del volumen inicial de 5 ml.








VALORES NORMALES:
Entre 48 y 64 por ciento.

RESULTADO:

Muestra 1: 50% y muestra 2: 46%

CONCLUSION
Esta practica, a diferencia de otras lleva un largo tiempo de procedimiento, por lo cual se debe de hacer con posicione y sin errores, asi como para tener un resultado confiable. 

viernes, 17 de octubre de 2014

Prueba de lazo o torniquete

Prueba de lazo o torniquete

Introducción:

Consiste en someter el antebrazo del paciente a una presión intermedia entre la sistólica y la diastólica durante 5 minutos. Tras la retirada del manguito inflable del tensiómetro, como para medir la T.A.  y esperar a que la piel recupere su estado relajado se observa la zona presionada. El conteo de petequias producidas por la rotura capilar en un área de unos 10 cm2 superior a 30 da positivo en el signo de Rumpel-Leede.
Normalmente no debe de producirse mas de 5 petequias por debajo de la comprensión, más de 10 petequias y sobre todo extendidas mas alla del cuarto superior del antebrazo es patológico.   

Tiene como finalidad determinar la fragilidad de las paredes capilares, estimar la tendencia a la hemorragia y ayuda a reconocer la trombocitopenia.

Valores Normales:

0-10 = 1+
10-20 = 2+
20-50 = 3+
50 o más petequias = 4+

Los valores aumentados pueden indicar coagulación intravascular difusa. disminución del fibrinogeno, disminución de la protombina, deficiencia del factor VII, trombocitopenia, tromboastenia, deficiencia de vitamina K. Y puede estar asociado a afecciones no relacionados con trastornos de coagulación como: escarlatina, hipertensión, diabetes, gripe, sarampión, escorbuto.

Conclusiones
Esta practica es muy fácil de realizar, solo debemos de tener presente que las únicas petequias que se cuentan son las que estén dentro de la zona determinada


sábado, 11 de octubre de 2014

TIEMPO DE SANGRADO

TIEMPO DE SANGRADO 

Introducción 
El tiempo de sangrado mide la fase primaria de la hemostasia: la interacción de

las plaquetas con la pared del vaso sanguíneo y la formación del tapón
hemostático. El tiempo de  sangrado constituye
la mejor prueba para detectar alteraciones de la función plaquetaria y es uno
de los principales estudios en los trastornos de la coagulación. Se hace una
pequeña herida en el lóbulo auricular o en 
el antebrazo y se anota el tiempo de sangrado y la velocidad con al que
se forma el coágulo plaquetario. La duración del sangrado de un capilar depende
de la calidad y cantidad de plaquetas y de la vasoconstricción.


El tiempo de sangrado es una prueba muy útil

para detectar anormalidades vasculares y más o menos útiles para detectar
anormalidades plaquetarias. Se utiliza principalmente para el diagnostico de la
enfermedad de von Willebrand, defecto hereditario de la molécula del factor
VIII y un tipo de seudohemofilia. Se sabe que la aspirina causa hemorragia
anormal en algunas personas sanas, pero no 
se ha comprobado que el tiempo de sangrado sea útil siempre para
identificar a estas personas. A pesar de que se ha visto que en la
trombocitopenia el tiempo de sangrado suele ser prolongado, esta prueba
constituye un método indirecto para identificar esta enfermedad.



MÉTODO DE IVY

Principio
Mediante esta
prueba se estudia la adhesión de las plaquetas al endotelio vascular y su capacidad
para formar el trombo plaquetario que detiene la hemorragia a nivel de un vaso
de pequeño calibre. Consiste, por tanto, en realizar una pequeña herida y medir
el tiempo que tarde en dejar de sangrar.

Materiales
     1.- Esfingomanómetro
o tensiómetro de mercurio.
     
2.- Lanceta
(dispositivo descartable estandarizado para tiempo de sangría).
     
3.- Cronómetro.
     
4.- Papel
Wathman Nº 1, cortado en círculos.
     
5.- Vendita
compresiva.
     
6.- Algodón y
alcohol.


Técnica
1.   Exponer el
antebrazo del paciente y escoger una zona libre de vénulas, hematomas, heridas
y otros. Si el paciente tiene marcada cantidad de vellos, afeite la zona.
2.     Limpie con
alcohol la zona escogida.
3.     Coloque el
tensiómetro en el brazo del paciente y regúlelo a 40 mm Hg.
4.     Se extrae
la lanceta de su reservorio estéril y se quita el seguro. No deben pasar más de
30 a 60
segundos entre la inflada del tensiómetro y la producción de la incisión.
5.     Se
presiona el disparador al mismo tiempo que el cronómetro y un segundo después
retire el dispositivo.
6.     Cada 30
segundos secar con el papel de filtro, no tocar los bordes de la incisión para
no interferir con el tapón plaquetario. Se anota el tiempo que tarda en cesar
la hemorragia, lo que corresponde al tiempo de sangría.

 Interpretación del resultado
     

El valor normal del tiempo de sangría según esta metodología es de 2 a 8 minutos, por lo que los

valores superiores a 10 minutos puede ser ya considerado patológico. Cuando el
tiempo se alarga más de 20 minutos, puede detenerse la hemorragia aplicando
sobre la herida una compresa de algodón y gasa estéril si es muy profunda.









MÉTODO DE DUKE
Con una lanceta se hace una pequeña incisión en
el lóbulo de la oreja. La sangre fluye por esta incisión y se mide el tiempo
que transcurre hasta que se detiene el sangrado.
Este

ensayo se lleva a cabo:

     Para
diagnosticar ciertos padecimientos hemorrágicos.
     
Antes de
realizar operaciones quirúrgicas.
     
Antes de
efectuar una punción en el hígado o el bazo.


Materiales
Una lanceta estéril.
Éter.
Filtro de papel (o
papel secante).
Si es posible, un
cronómetro o, en su lugar, un reloj con segundero.

Técnica
1.-Con una lanceta estéril, se practica en el borde inferior del lobulo de la oreja una punción de 3mm de profundidad. Se pone en marcha el cronometro. 
2.- A intervalos de medio minuto, se aplica cuidadosamente sobre la gota de sangre el borde de un pequeño disco de papel filtro, cuidando de no tocar la piel,. Esta maniobra por objeto es impedir que se forme un coagulo en la gota de sangre sobre la herida, pues los tiempos de sangrado resultaran a normalmente bajos. 
3.- Utilizando una nueva zona de papel filtro para cada secado de medio minuto, puede tenerse un registro conveniente del tiempo total ( Tiempo en minutos =numero de gotas divididas entre dos) Se toma como punto final al momento en el cual el papel filtro ya no absorbe sangre. 

Resultados
     
Comunique
el tiempo de sangrado redondeándolo al medio minuto más cercano.

Observaciones
     
Si el
tiempo de sangrado se prolonga examine una extensión de sangre teñida según el
método de Romanowski para observar si las plaquetas son escasas.

Interpretación

del resultado

     
El valor
de referencia del tiempo de sangría según este método es de 1 a 4 segundos.












RESULTADOS:
  • *Método de DUKE: 1:33 minutos.
  • *Método de IVY:   3:48minutos.

CONCLUSIONEs
Esta practica es sencilla de realizar, pero necesitamos practicarla de nuevo, 

ROSA DE BENGALA

ROSA DE BENGALA 

(ANTIGENO BRUCELAR AMORTIGUADOR)PARA EL DIAGNOSTICO DE BRUCELOSIS




INTRODUCCIÓN:
La brucelosis es una enfermedad infecciosa esto es causada por que el hombre esta en contacto con a bacteria llamada brucella esta principalmente utiliza de resorvorio a los animales.
Es una prueba de aglutinación rápida en placa para la detección temprana de aglutininas específicas de Brucella (Brucella melitensis,abortus y suis)
Proporciona una aproximación diagnóstica en pocos minutos con una sensibilidad y especificidad muy altas. Presenta elevado grado de correlación con la seroaglutinación y, por su simplicidad, es muy útil como prueba de despistaje inicial o screening. Sus falsos negativos se limitan a enfermos con procesos de pocos días de evolución y a algunos casos de enfermedad de curso muy prolongado.


MATERIAL


  1. Placa de prueba.
  2. Pipeta desechable.

REACTIVOS
  1. Antígeno Rosa de Bengala
  2. Control positivo

PROCEDIMIENTO:

  1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo controles y muestra de suero.
  2. Con la pipeta automatica colocar 30 uL del suero del paciente en uno de los anillos de la placa.
  3. Despues se mezcla el Antígeno Rosa de Bengala hata que este homogéneo despues agregar 30 uL en la placa de prueba en e mismo anilo donde se coloco la muestra del paciente mezclar con ayuda de un aplicador. repetir este paso para cada muestra de paciente y controles.
  4. agitar la placa manualmente con movimientos rotatorios durante 4 minutos.
  5. leer  la placa con ayuda de una fuente de luz directa.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
Suero Negativo
No se presenta aglutinación
Suero Positivo
Se presenta aglutinación 

RESULTADOS NEGATIVO  

Paciente: Yameli Noely Sotuyo Mata
La prueba salio negativa.

sábado, 4 de octubre de 2014

VDRL-USR

VDRL-USR

Antígeno de cardiolipina para investigar reaginas de la sífilis en Suero sin inactivar, en Plasma y L.C.R (no requiere reconstruccion)

Introducción 
La Sífilis es una enfermedad generalizada, producida por Treponema pallidum.
 Infecta el área genital, los labios, la boca o el ano y afecta tanto a los hombres como a las mujeres. Por lo general se adquiere por contacto sexual con una persona que la tiene. También puede pasar de la madre al bebé durante el embarazo. 
La etapa temprana de la sífilis suele causar una llaga única, pequeña e indolora. Algunas veces, causa inflamación de los ganglios linfáticos cercanos. Si no se trata, generalmente causa una erupción cutánea que no pica, frecuentemente en manos y pies. Muchas personas no notan los síntomas durante años. Los síntomas pueden desaparecer y aparecer nuevamente.
El diagnóstico se basa en la serología, con los métodos se determinan las 2 clases de anticuerpos:
Cardiolipina: No treponema e inespecíficos.
Antitreponemas: Específicos.
Debido a la facilidad  en su determinación en el tipo Cardiolopina se utilicen universalmente en las exploraciones iniciales, exámenes individuales o encuestas de población. La variante técnica más comúnmente empleada llamada VDRL (Venereal Disease Research laboratory) que determina la floculación en placa (cuantitativa) del antígeno con cardiolipina y lecitina.


Objetivo
 Mediante el empleo de conocimientos previamente adquiridos, lograr el correcto desarrollo de la práctica y de esta manera identificar la presencia o ausencia de los anticuerpos antes mencionados.

   Reactivos
  • Antígeno en suspensión estabilizado (VDRL)
  • Control positivo.
  • Control Negativo.
  • Aguja No. 21 sin bisel.
  • Pipetas desechables.

Material
  • Placa cóncava
  • Agitador mecánico
  • Cronómetro
  • Microscopio
Muestra:   SUERO

Método cualitativo
1.     En un anillo de la placa cóncava deposite 0.05 ml. del suero problema.

2.       En anillos diferentes colocar una gota de suero control positivo y en otra una gota de control 
negativo, extender sobre la superficie del anillo.

   3.       Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizada previamente resuspendido.

   4.       Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm. Durante 4 min. Las pruebas que se realicen en clima extremadamente seco puede provocar la evaporación de las muestras, por lo tanto, la placa en rotación se puede cubrir con la tapa de una caja de petri humedecida previamente con una gasa. (Este paso se realizó de manera manual)

5.       Leer inmediatamente al microscopio con objetivo y ocular 10x.























Resultados
Interpretación:
Control positivo: Presencia de floculación mediana o grande.
Control negativo: Ausencia de floculación.

Resultado de la paciente Yameli Soluyo Mata :  NEGATIVO 


Conclusiones
La identificación del Treponema pallidum es posible después de la realización de la práctica anterior, mediante la observación de la floculación en las placas correspondientes. En caso de que los resultados hubieran sido positivos, habría sido necesaria la  comprobación mediante la realización de titulaciones que confirmaran la positividad del suero problema por la facilidad de determinación con el antígeno VDRL. La utilidad de la prueba radica en que si la enfermedad (sífilis) se detecta a tiempo, se cura fácilmente con antibióticos. El uso correcto de preservativos de látex disminuye enormemente, aunque no elimina, el riesgo de adquirir y contagiarse la sífilis.
.
NOTA: Al realizar esta practica, tuvimos la oportunidad de comparar una muestra positiva, y una negativa, así diferenciamos bien los resultados cuando esta enfermedad esta presente